上海菌種培育培訓

㈠ 蘑菇菌種是怎麼培養的

在自然界里，食用菌都不是單獨存在的，而是和許多細菌、放射菌、黴菌等生活在一起的。所謂菌種分離，就是把這些和食用菌一起生活的雜菌分離出來，通過培養，獲得純的優良菌種。菌種分母種、原種、栽培種。
(一）母種的分離培養

食用菌母種的分離，可分為孢子分離法、組織分離法以及基內菌絲分離等。
1.孢子分離法
孢子分離法，是用食用菌的有性孢子或無性孢子萌發成菌絲，培養成菌種的方法。這種菌種生活力較強，但孢子個體之間有差異，且自然分化現象較嚴重，變異大，需經出菇試驗才能在生產上應用。
（l）單孢分離法：是每次或每支試管只取一個擔孢子， 讓它萌發成菌絲體來獲得純菌種的方法。蘑菇和草菇用單孢分離得到的菌絲，有結實能力，可採用此法分離生產純菌種。單孢分離生產上較少採用，而且技術復雜，一般採用多孢分離法。
（2）多孢分離法：就是把許多孢子接種在同一培養基上，讓它們萌發、自由交配來獲得食用菌純菌種的一種方法。具體操作方法，有以下幾種：
①種菇孢子彈射法：選擇個體健壯、朵形圓正，無病蟲害、出菇均勻、高產穩產，適應性強的八九分成熟的種菇，切去大部分，菌柄用無菌水沖洗數遍後再用已滅菌的紗布或脫脂棉、濾紙吸干表面水分。在接種箱或無菌室內，把種菇的菌褶朝下用鐵絲倒掛在玻璃漏斗下面，漏鬥倒蓋在培養皿上面；上端小孔用棉花塞住。培養皿放在一個鋪有紗布的搪瓷盤上，靜置12～20小時，菌褶上的孢子就會散落在培養皿內。形成一層粉末狀孢子印（平菇極淡紫色，蘑菇、草菇 為褐色，香菇、金針菇孢子印白色）。用接種針沾取少量孢子在試管中的瓊脂外面或培養皿上劃線接種。待孢子萌發，生成菌落時，選孢子萌發早、長勢好的菌落進行試管培養。
還可用孢子採集器收集孢子。方法是選好種菇後，按上述程序，輕輕掀開玻璃鍾罩，將種菇柄朝下插在孢子採收器的鋼絲架上，放在培養皿正中央。隨即蓋好玻璃罩，用紗布將鍾掌周圍塞好。並在紗布上倒少許升汞或無菌水。移入 20℃左右恆溫箱培養。
②褶上塗抹法：按無菌操作分離時；應選擇成熟的種菇，用接種針直接插入褶片之間，輕輕抹取褶片表面子實體尚未彈射的孢子，再在培養基上劃線接種。
③鉤懸法：取成熟菌蓋的幾片菌褶或一小塊耳片（黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用無菌不銹鋼絲（或鐵絲、棉線等其他懸掛材料）懸掛於三角瓶內的培養基的上方，勿使接觸到培養基或四周瓶壁。置適宜溫度下培養、轉接即可。
④貼附法：按無菌操作將成熟的菌褶或耳片取一小塊， 用溶化的瓊脂培養基或阿拉伯膠、漿糊等貼附在配管斜面培養基正上方的試管壁上。經6～12小時的培養，待孢子落在斜面上，立即把孢子連同部分瓊脂培養基移植到新的試管中培養即可。
孢子分離得到的母種、必須進一步提純復壯，當母種定植一星期左右，菌絲布滿斜面時，選擇菌絲健壯、生長旺盛無老化、無感染雜茵的母種試管，進而轉管擴大，一般到栽培種，轉管不宜超過5次。
孢子分離得到的母種，必須通過出菇試驗，鑒定為優質菌種後，才可供生產使用。
一般菌類如蘑菇、平菇、鳳尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢分離法獲得母種。
現就銀耳孢子分離略述於下：
按無菌操作獲取種耳後，懸掛種耳的三角瓶經12小時培養後，瓶底培養基表面就有"孢子印"。取出種耳，置 20℃—25℃溫箱培養2～3天，培養基表面會出現乳白色透明的糊狀小菌落，就是銀耳的酵母狀分生孢子形成的少量銀耳菌絲。此時移接入試管斜面培養基上，待長滿斜面後，再移接入營養豐富，且表面比較乾燥的培養基上。經30天左右，菌落長出白色菌絲。
銀耳的酵母狀分生孢子、菌絲只有與羽毛狀菌絲的子囊菌（香灰菌絲）混合培養時，由後者幫助分解木材及其他一些纖維物質，提供營養，才能利於銀耳孢子萌發，菌絲的定植和子實體的形成。
在兩種菌絲交會時，先選出兩種純菌絲。
羽毛狀菌絲要純化選育，一般要選取生長迅速，爬壁力強的試管斜面或種瓶，取先端菌絲，轉管移接，置25℃—28℃上培養，重復轉管幾次即可得到優良純種。
銀耳菌絲的特點，菌絲生長緩慢，擔孢子也不易萌發。在進行兩菌混合時，先取經8～IO天培養的銀耳菌絲斜面，按無菌操作方法在該斜面上距銀耳菌絲約0.5厘米處接入一 小塊羽毛狀菌絲。置25℃下培養1周即得到混合好的銀耳母種。
2．組織分離培養法
利用子實體內部組織，進行無性繁殖而獲得母種的簡便方法，即組織分離。該法操作簡便，菌絲生長發育快，品種特性易保存下來，特別是雜交育種後，優良菌株用組織分離法能使遺傳特性穩定下來。常採用以下分離方法。
（l）子實體分離：種菇要選朵大蓋厚，柄短，八九分成熟的優良品種。切去菇兩基部，在無菌箱內以0.1％的升汞水浸幾分鍾，再用無菌水沖洗並揩乾或用75％酒精棉球擦拭菌蓋與菌柄2次，進行表面消毒。接種時，只要將種菇撕開，在萌蓋和菌柄交界處或菌褶處，挑取一小塊組織；移接 到PDA培養基上。置25℃左右溫度下培養3-5天，就可以看到組織上產生白色絨毛狀菌絲，轉管擴大即得到菌種。如香菇、平菇等可以用此方法。
（2）菌核分離：茯苓、豬苓、雷丸等菌的子實體不易採集。而常見的是它貯藏營養的菌核。用菌核分離，同樣可以獲得菌種。方法是將菌核表面洗凈，用酒精或升汞消毒後，切開菌核，取中間組織一小塊，約黃豆大小，接種在PDA 培養基斜面上，保溫培養。應注意的是，菌核是貯藏器官，大部分是多糖類物質，只含有少量的菌絲，因此挑取的組織塊要大一些，如果組織塊過小，則不易分出菌種。
（3）菌素分離：有一部分子實體不易找到，也沒有菌核，可以用菌素進行分離。如蜜環菌、假蜜環菌。其操作方法是先用酒精或升汞將菌素表面黑色皮層輕輕擦拭2～3次， 然後去掉黑色外皮層（菌鞘），抽出白色菌髓部分；用無菌剪刀將菌髓剪一小段，接種在培養基上，保溫培養，即得該菌菌種。
菌素分離要注意：因菌素比較細小，分離素也比較細小，分離時極易污染雜菌，所以要嚴格操作。
3．基內菌絲分離培養法
利用食用菌生育的基質作為分離材料，來得到純菌種的一種方法，叫基內菌絲分離法。
此種分離方法是適宜只有在特定的季節才出現，而且是朝生暮死，不易採得的子實體。基內分離法與組織分離法不同之點是，乾燥的菇木或耳木中的菌絲常呈休眠狀態。接種後有時並不立刻恢復生長。因此，有必要保留較長的時間（約1個月），以斷定菌絲是否能成活。基內菌絲分離法又可分為，材中菌絲分離（即菇木或耳木分離法）及土中菌絲分離法等。
（1）材中菌絲分離法：就是菇木或耳木分離法，為了減少雜菌的感染，菇（耳）木在分離之前，必須進行無菌處理。可以把菇（耳）水表面用酒精燈火焰輕輕燒過，以燒死黴菌的孢子，或再用0.1％的升汞水浸孢幾分鍾，然後用無菌水沖洗後用無菌濾紙吸干。接種塊切取時應注意。接種塊必須在該菌菌絲分布的范圍內切取。所以，菌絲生長緩慢的種類應淺取；菌種生長快的種類可以深取。同時。還應根據菇菌的種類、木材質地、菇（耳）木粗細、發育時間的長短來確定菌絲分布的范圍。然後用一把利刀進行切取。接種塊應盡量小些，以減少雜菌感染機會，提離菌種的純度。接種塊移到培養基上，就應該放到適合菌絲生長的22℃～26℃ 的溫室或溫箱中培養，使菌絲恢復生長。
（2）土中菌絲分離：食用菌種類很多，許多土生的食用菌；孢子不易萌發。組織分離也不易成功，用土中菌絲分離獲得純種的方法，叫土中菌絲分離。
土中菌絲分離時要注意，由於土中菌絲體的周圍生活著多種多樣的土壤微生物，因此分離時必須盡可能避開這些微生物的干擾，盡可能批取清潔菌絲素的尖端、不帶雜物的菌絲接種，反復用無菌水沖洗，在培養基中加入一些抑制細菌 生長的葯物，如 40微克／升的鏈黴素或金黴素。如發現感染細菌，可以把菌落邊緣的菌絲挑出來，接種到木屑培養基中。因細菌沒有分解木質素的能力，因此在木屑培養基中不易擴展；只局限於接種處。待菌絲長出感染區後，就可以再進行擴大提純了。
（3）子實體基部分離：從瓶栽、袋栽或大床栽培的子實體基部分離出新菌絲的方法，叫子實體基部分離，現以袋栽銀耳為例說明：
從出耳早、出耳率離、無病蟲害的栽培室中；選擇生活力最強的幼耳5袋，移到氣候溫和，有散射光的野外場所進行後期培養，以增強菌絲體的生活力。經培養7～10天後，待子實體直徑達4～5厘米時便可取回，作為分離的母體。再從中篩選最理想的一朵，用利刀割掉銀耳子實體，放置於 0℃的冰箱或有敵敵畏的容器中過夜，以便殺死瓶中的害蟲。然後用75％酒精或升汞擦洗耳基和袋子外邊的雜質，連同接種工具、接種培養基等移進無菌室。經滅菌後，用接種刀把袋口上部約15毫米厚的老菌根挖除，並進行培養。待袋口露出白色菌絲時，用接種針挑取一塊半粒米大的白色菌結體，迅速移入母種試管培養基的中央，輕輕地脫去接種針， 塞上棉塞。 為了能夠獲得較多的母種，一次接種量要有100—200支試管，以便從中選擇。分離後應及時移入22℃—24℃恆溫箱或溫室中培養。由於培養基內水分較多，菌絲恢復要比耳木分離得快。經2-3天後，分離物的邊緣就可看 到白色菌絲。每天要至少觀察兩次，以便提純。觀察、提純方法與耳木分離法擔同。經適溫培養10-15天後，當接種塊扭結團出現紅、黃色水珠時，即可擴大原種。

（二）原種和栽培種的接種培養

母種獲得以後，為了滿足菌種生產的需要。應選出優良、純度高的母種進一步擴大為原種。
原種培養基一般採用棉籽殼、木屑、草類等培養基。
瓶裝或袋裝的原種培養基滅菌後，可送入滅過菌的接種箱內，待瓶中的培養基冷至30℃以下，可按照無菌操作程序進行接種。
菌種瓶（袋）放入培養室時，要經常進行檢查，一經發現雜菌污染，立即取出。培養成的原種，菌絲體必須健壯有力，緊貼瓶壁而不幹縮，顏色純正，具有一定清香味，生活力強，擴製成栽培種時吃料快。
栽培種就是將原種進一步擴大培養成三級種，它和原種的接種及培養相同。一般香菇、平菇、冬菇、猴頭、木耳、銀耳的栽培種多用鋸木、棉皮作培養基。蘑菇多用糞草做培養料。
栽培種要求料塊不脫水干縮。菌絲體健壯有力、顏色純正，有清香味，無老化現象，無雜菌污染，有的種許可有少量原基，接入栽培料後，發菌快，長勢好，生活力強。
原種在接栽培種時，原種瓶口的一層菌絲體應挖去不用。

（三）液體種的簡單培養

目前，用液體深層發酵法生產菌種，具有生產量大、周期短、菌齡整齊、成本低廉、接種方便等特點，是實現食用菌工廠化生產的目標。現將液體種培育過程簡述於後，供參考。
簡言之就是將純正優良的菌種，接入液體培養基（固體培養基不加凝固劑），使菌絲繁殖形成大量小菌球，然後將這種培養基拌入木屑或棉籽皮料內，製成菌塊、培養其形成子實體。還可用於制原種、栽培種。
培養液體菌種，可將培養液裝入三角瓶中，約占空瓶的五分之一重量。用搖瓶機（也稱搖床）來培養。搖瓶機有旋轉式和往復式兩種，一般多用往復式。液體培養基可用馬鈴薯汁（加糖），麥芽汁配製，也可用玉米粉、豆餅粉、糖、無機鹽等配製。可以混合培養基，因適用於多種食用菌和葯用菌的培養，均有好效果。組分：豆餅粉2％，玉米粉1％， 葡萄糖3％，酵母粉0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，碳酸鈣 0.2％， pH自然， 12℃滅菌半小時。然後接種培養。
如果生產量較大，在三角瓶的基礎上，再逐級擴大種子缸，發酵罐中進行液體深層通氣發酵，產生大量菌種。但由於生產中要求設備繁多，技術性強，我們還應創造條件；實現食用菌栽培的現代化。

（四）菌種質量的鑒定

菌種質量鑒定最好的方法是，做出菇試驗。但是時間比較長。在購置菌種時，或在菌種生產中，如何能知菌絲生長情況，快速判斷菌種質量？我們介紹幾種方法：
1.肉眼觀察：優良菌種菌絲濃白，絨狀，粗壯密集，生長整齊，速度快，香味濃厚。
2.優良菌種標准可歸納為："純、香、正、壯、潤"五個字。檢查時，打開瓶塞，從菌種瓶中部取出小塊菌絲體，觀察色澤，聞其氣味，手捏料塊檢查其含水量，看是否符合上述要求標准。
3.顯微鏡檢查：挑取少量菌絲，置顯微鏡上觀察其形態，菌絲分枝，分隔情況，鎖狀聯合，細胞膜的厚薄。 培養觀察：從菌種瓶中挑取小塊菌絲體，接種斜面試管培養基上，置23℃～25℃恆溫中培養，經五周後檢查菌種生活力。如果菌絲生長快，旺盛純一，健壯濃厚，長且整齊，則表示菌種的生活力強。
4.分塊法：在桌上放一張白紙，把菌齡相同的菌種從瓶內取出一大塊，用手分成2塊，再把2塊分成4塊，4塊 分成8塊，依次進行。優良菌種整塊多，碎渣少。劣次菌整塊少，碎渣多。
5.液體菌種鑒別：當三角瓶或發酵缸培養3-7天後，如液面出現氣泡，產生"油皮"、混濁等現象，說明菌種本 身帶有雜菌。如菌塊上浮，或遲遲長出很薄的菌絲層，則說明菌種生活力弱。白塊四周的菌絲生長快、濃白、棉絮狀，表明菌種生命力強。

（五）菌種生產過程中的雜茵防治

在生產菌種時，要時刻注意雜菌污染，以防為主，一旦發生，根治很不容易。所以整個制種過程都必須在無菌條件下進行。接種箱及所有分離、接種的用具、器皿，都要進行嚴格的消毒滅菌。工作人員的雙手要用消毒劑清洗，並穿戴消過毒的工作服、帽和口罩，動作要敏捷、准確，盡量不要講話走動，以防空氣中的雜菌感染。
分離母種時，選擇出菇早、生活力強，第一潮菇是關鍵，因它生活力強，接種後迅速佔領陣地，無雜菌侵入的機會。
被污染的菌種，原因是多方面的，一般是滅菌不徹底所致，或因接種時無菌操作不嚴、瓶蓋不合適造成的。所以滅菌一定要徹底，最好在接種萌將培養基置25℃左右溫箱中做效果檢查，經2天不長雜菌，說明徹底，可以使用，接種過程中一定要嚴格無菌操作。
污染雜菌另一個原因可能是分離母種時感染雜菌，因種菇表面帶菌，消毒不徹底，通過組織塊將雜菌帶入培養基。
總之，污染機會很多，要注意環境消毒，按無菌操作規程徹底滅菌，層層把關，環環抓緊，嚴加註意；提離菌種質量。

㈡ 上海有沒有做細菌鑒定的實驗室或代做細菌培養的實驗室

病情分析：細菌培養可以鑒定感染細菌的類型以及 可以做葯敏實驗以指導抗生素的選擇. 意見建議：我的意見是細菌培養可以鑒定感染細菌的類型以及 可以做葯敏實驗以指導抗生素的選擇.

㈢ 有沒有在上海農科院食用菌所工作或學習的人，能不能簡介一下貴所

http://www.mushroom.sh.cn/website/asp/news/data_show.asp?Fid=59
上海市農業科學院食用菌研究所成立於1960年，是我國建所最早、學科齊全、綜合技術力量較強的食用菌專業研究所，現有職工60多人，其中有碩博士學歷的人員30多人，已形成食葯用菌遺傳、育種、栽培和深加工等優勢研究領域。近年來我所在我國食用菌未來兩大發展方向上進行了大量的研究工作，在工廠化栽培技術方面，進行了從工廠化專用品種的選育，到配套裁培技術，再到控制系統等關鍵技術的研究；在深加工技術方面，進行了加工專用品種的選育、配套裁培技術和標准化加工技術的研究。我所現有農業部「上海出口食用菌優良菌種標准化繁育中心」；農業部「國家食用菌加工技術研發分中心」；「上海市食用菌工程中心」；「上海市農業遺傳育種重點實驗室微生物分室」 等國家和上海市的科研平台，配備了國際一流的研究設施和設備。經歷了近五十年的艱苦創業，已承擔部市級項目上百項，獲得國家、農業部和上海市的各種獎項四十餘項，在國內外的各類期刊雜志上已發表了學術論文700多篇。我所選育出的優良菌種、研製出的高產優質栽培技術已輻射全國各地，有的甚至還輸出國外。

㈣ 食用菌菌種是怎麼來的，怎麼培養出來高手指教。特別是野生菌。

目前大部分野生菌類還不能人工種植。所以菌種很少有繁育 的。能夠人工種植的菌類一般是通過孢子分離或者組織分離的方法獲得。國家有這種科研機構。

㈤ 我想學菌種種植，那裡有培訓的

不知你是什麼地方的。河北石家莊有菌類種植技術培訓機構。

㈥ 菌種培養必須掌握哪些關鍵技術

菌種分離、篩選是獲得優良菌種的第一步，而菌種培養是保持良種種性和應用良種產生效益的更重要一步。這里介紹菌種培養科學管理「三關鍵」。

（1）及時檢查

各級菌種在擴繁後3天起至7天內，每天檢查一次。用工作燈照亮菌種瓶內表面，觀察接種塊和四周，有否出現非正常菌絲和黃、紅、黑、綠等斑點，寧嚴勿疏，一經發現異常，立即剔除，保證菌種純度。

（2）控溫防潮

根據銀耳生物學特性，創造適宜菌絲生長的溫度。要注意瓶內菌溫一般會比室溫高2～3℃。隨著菌絲生長量的增加，菌種培養室的溫度也逐步上升，飽和容量的培養室在適溫的基礎上，每5天需降溫1℃。在夏、冬逆境條件下，應採取降溫與升溫措施，如裝空調機，到高海拔山區制種，加強培育室屋頂遮蔭，室內風扇、排氣扇降溫等。但室內不可噴水，要求室內空氣相對濕度70%以下，偏濕的環境易雜菌孳生。越冬升溫可採取室內安裝暖氣管、暖氣片升溫，採用空調升溫更好，採用煤炭爐升溫的，應設排氣管道將煤煙排出室外。在梅雨季節濕度大，可在室內存放石灰粉吸潮，利用排風扇通風降濕。

（3）適度光照

銀耳菌種培養需要散射光，但防止陽光直射。

㈦ 個人怎樣學上海農科院食用菌技術

可以通過參加農科院食用菌機構的培訓，或者購買相關的技術資料來學習。

㈧ 蘑菇菌種自己怎麼培養

蘑菇菌種的培養方法：

1、地溝覆土法：

選地勢平坦的場地，挖深30厘米、寬1米、長不限的畦床，床底略呈龜背狀，床與床之間相隔80厘米以上，並留好排水溝。畦床先用1000倍敵敵畏噴灑殺蟲，用5%石灰水消毒殺菌。將發好菌的菌袋塑料膜包去，把菌棒橫卧於床內，菌棒間相隔2~3厘米，排滿畦床。把事先消毒過的覆土材料覆於菌棒上，澆一遍透水。

這時泥土必然會沉入菌棒之間，再次用土添鋪，再澆水，一直到菌棒之間全都是稀泥為止。再在菌棒上鋪一層4~5厘米厚的覆土，用水均勻的澆灌，直到覆土層全部吃透水，覆土工作結束。如果是在室外修建的畦床，要架設小拱棚，覆蓋塑料膜或草蓮等遮陰物。一般7~10天就可出菇了。

2、雙排菌牆法：

把長好的菌棒塑料膜脫去，平擺成相距30厘米左右的雙排菌牆，每層菌棒之間覆一層3厘米厚的土，每層菌棒都向內縮進，形成上窄下寬的塔形。中間的空隙用土填滿。7~10天左右出菇後，從堆頂部澆水，使其自然補水。

(8)上海菌種培育培訓擴展閱讀：

蘑菇菌種的生長條件：

1、溫度：蘑菇屬變溫結實性菇類，也就是說營養生長和生殖生長所需溫度不同。菌絲生長的溫度范圍為5~32度，最適宜的溫度為24~28度。子實體形成的最適宜溫度為13~20度，低於10度生長緩慢，高於25度不易出菇。

蘑菇菌絲耐低溫能力強，成品菌棒在零下 30 多度也不會被凍死，溫度回升後菌絲可繼續生長，並且不會影響後期子實體的形成和產量。在出菇溫度范圍內，溫度越高，蘑菇生長得越快，但菌蓋薄、質量差、顏色淺；溫度低，蘑菇生長慢，但菌蓋厚，質量好，顏色深。

2、濕度：蘑菇含水量達 90% 以上，水是主要含量。水是平菇分解吸收培養料基質中各類營養的必須的代謝環境，只有能溶解於水的物質才能進入平菇的菌絲細胞內，被吸收和利用。

3、光線：蘑菇在菌絲生長階段平菇不需要光線，在完全黑暗溫度恆定的條件下菌絲生長得最好最快。這主要是因為光波中的藍紫光對平菇菌絲有抑製作用。在出菇階段，環境需要一定的散射光，以在出菇場所內能正常看報紙為度。

光線的作用是誘導出菇和使菌蓋發育，研究表明：完全黑暗不能形成菇蕾；光線不足，容易長出柄長蓋小的畸型菇；在適宜的光照下菇蕾才能形成和正常的生長。但是強光會妨礙平菇的正常生長。

㈨ 哪裡可以學習食用菌種植技術最好免費的

其實參加安徽省金農食用菌科技開發有限責任公司舉辦的食用菌函授班較好，學費很低，還有贈送試驗用的菌種，我覺得很劃算，在家自學又能親手操作，秩序漸進，我就是這樣學會的。本人覺得這樣的學習班較實在技術實用可靠。