Ⅰ 乙型肝炎病毒核心抗體IgM診斷試劑盒 有哪些廠家
英科新創(廈門)科技有限公司;上海科華生物工程股份有限公司;中山生物工程有限公司;珠海麗珠試劑股份有限公司;上海江萊生物科技有限公司等。
Ⅱ 求達安基因丙型肝炎病毒RNA試劑盒的說明書的試驗步驟
【檢驗方法】
1 實驗前准備
1.1 每瓶蛋白酶K(乾粉)中各加入1.375ml的洗脫液,充分混勻,溶解。-20℃保存。
1.2 每管Carrier RNA(乾粉)中各加入110µl的HCV內標溶液,充分混勻,溶解。-20℃保存(Carrier RNA為白色或半透明物質,請仔細檢查,確保其完全
溶解)。
1.3抑制物去除液(濃縮液)中加入10ml的無水乙醇,並在瓶蓋及瓶身上打勾。室溫保存。
1.4每瓶去離子液(濃縮液)中各加入44ml的無水乙醇,並在瓶蓋及瓶身上打勾。室溫保存。
1.5 進行實驗前須將病毒裂解液與Carrier RNA進行混合(現配現用),配置成裂解工作液。其比例見下表:
1人份 24人份 48人份
病毒裂解液 200µl 4.8ml 9.6ml
Carrier RNA 4µl 96µl 192µl
註:如將病毒裂解液、抑制物去除液不恰當地放置在低溫時,可能會出現結晶沉澱。37℃溫育至其消失即可;
各試劑使用完後,請旋緊瓶蓋。
2 核酸提取(樣本制備區)
將待測樣本與陰性質控品、HCV 強陽性質控品、HCV 臨界陽性質控品進行同步處理。
2.1 在1.5ml的無菌離心管內加入50µl的蛋白酶K;
2.2 取樣本200µl加入離心管中;
2.3 再加入200µl的裂解工作液(即已含Carrier RNA的病毒裂解液),蓋緊管蓋,漩渦振盪15秒以充分混勻,高速離心10秒(防止溫育時產生氣泡),72℃
10分鍾。同時可將洗脫液置於72℃預熱;
2.4 再加入250µl 無水乙醇,蓋緊管蓋,振盪15秒;
2.5 將混合液全部吸至離心柱,室溫下12,000rpm離心1分鍾,將離心柱裝至新的收集管;
2.6 將500µl的抑制物去除液加入離心柱,室溫下12,000rpm離心1分鍾,將離心柱裝至新的收集管;
2.7 將500µl的去離子液加入離心柱,室溫下12,000rpm離心1分鍾,將離心柱裝至新的收集管;
2.8 再次將500µl的去離子液加入離心柱,室溫下12,000rpm離心1分鍾,將離心柱裝至新的收集管;
2.9 將離心柱-收集管於室溫下14,000rpm離心3分鍾以除去殘余的乙醇;
2.10 將離心柱取出,放置於新的1.5ml離心管。打開離心柱蓋子,72℃放置2分鍾(使用乾式恆溫器,不能使用水浴鍋);
2.11 在離心柱的膜的正上方小心加入72℃預熱的洗脫液35µl,蓋緊離心柱管蓋,室溫靜置1分鍾後,14,000rpm離心1分鍾。離心管內即為病毒核酸溶液,建
議立即使用,如需保存,置於-20℃。
3 PCR試劑准備(試劑准備區)
大包裝規格試劑適用:
從試劑盒中取出HCV 反應液A、HCV 反應液B、HCV 反應液C,室溫融化後振盪混勻,8,000rpm離心數秒後使用。
取N個(N=待測樣本個數+陰性質控品+HCV強陽性質控品+HCV臨界陽性質控品+4管HCV 陽性定量參考品)PCR反應管,
HCV單人份擴增體系配製如下表:
組分 HCV 反應液A HCV 反應液B HCV 反應液C 總體積
用量 2µl 3µl 25µl 30µl
將各組分充分混合,混合好後進行短時離心將管壁上的液體全部離心至管底,之後將30µl擴增體系分裝到PCR管中。
單管單人份規格試劑適用:
直接使用HCV-PCR反應管。
4 加樣(樣本制備區)
往上述HCV反應管中用帶濾芯吸嘴分別加入提取後的待測樣本核酸、HCV陰性質控品、HCV強陽性質控品、HCV臨界陽性質控品和直接加入HCV 陽性定量參
考品20µl。蓋緊管蓋,8,000rpm離心數秒後轉移至擴增檢測區。
Ⅲ 酶聯免疫診斷試劑盒的底物A和B分別什麼作用
酶聯免疫診斷試劑盒(上海科華的試劑盒)的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用於顯色。 另外,常用的底物還有:1)AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應物為黃色的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍四氮唑,反應產物為不溶性的藍色沉澱 什麼是TMB?TMB即四甲基聯苯胺(3,3』,5,5』-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,
且由於這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉澱物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發色團。同時反應產物的沉澱,使得HRP的活性部位更加暴露,利於酶氧化反應進行。
TMB的反應產物為深藍色,利於光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。
由於上述優點,目前TMB常用於光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配製。另外,TMB是一種較強的皮膚刺激劑,並有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。
TMB經HRP作用後共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試
劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等
優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止後,TMB產物由藍色呈
黃色,可在比色計中定量,最適吸收波長為405nm。
ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所採用。
Ⅳ 誰有上海之江的丙型肝炎病毒(HCV)核酸定量測定試劑盒(熒光PCR法)說明書國械注准20153400264
網路文庫里有,你可以點擊這個鏈接去查看。
https://wk..com/view/a4a094d0d15abe23482f4d2d?ivk_sa=1023194j
Ⅳ 獻血時丙型肝炎病毒抗體單種試劑檢測不合格,請問是
如果是檢測出有丙型肝炎抗體的話,建議去醫院檢查一下丙肝的rna復制和肝功能。然後再做定論,丙肝現在是一種可以治癒的疾病,早發現,早治療。
Ⅵ 懂醫學的朋友,麻煩幫我看一下我的「丙肝抗體檢測報告單」,謝謝。
純手打,解釋給你聽吧
Ig是免疫球蛋白的簡寫,是機體針對性地抵禦微生物(細菌,病毒)產生的,一共有5種:其中IgG是感染性疾病慢性期的標志,IgM是近期感染時會升高。
做這個檢查是看你以前感染過丙肝病毒沒,結果是陰性的,說明你以前沒感染過。
至於S/CO是做這個檢查的試劑盒的一個參數,比值越大說明你血里的這種免疫球蛋白含量越高(其他蛋白會非特異地造成誤差,就像你看空氣是透明的一樣,其實不是的,裡面的飛塵、霧也能夠吸收/反射光線),你只有0.437,恭喜你!(這么解釋,你如果還不懂,不放心,那我這個醫生就很失敗了)。
Ⅶ 丙肝核心抗原檢測試劑盒的介紹
丙肝核心抗原檢測試劑由基因重組表達的丙型肝炎病毒核心區抗原(HCV-cAg)免疫制備的抗丙型肝炎病毒核心單克隆抗體包被微孔板、辣根過氧化物酶標記抗體及陽性、陰性對照等組成,應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測人血清或血漿樣 品中丙型肝炎病毒核心抗原。
Ⅷ 檢測丙型肝炎病毒抗體結果提示是灰區,這是什麼意思
如果抗-HCV陽性的話應該就感染了 丙型肝炎分為急性丙型肝炎和慢性丙型肝炎兩種: (一)急性丙型肝炎的診斷標准 1.流行病學史:有輸血史、應用血液製品史或明確的丙型肝炎暴露史。輸血後或使用血液製品後,急性丙型肝炎的潛伏期為2~16周(平均7周)。 2.臨床表現:全身乏力、食慾減退、惡心和右季肋部疼痛等,少數伴低熱,輕度肝腫大,部分患者可出現脾腫大,少數患者可出現黃疽。部分患者無明顯症狀,表現為隱匿性感染。 3.實驗室檢查:谷丙轉氨酶多呈輕度和中度升高,抗-HCV(丙型肝炎病毒抗體)和HCV RNA(丙型肝炎病毒核糖核酸陽性)。HCV RNA常在谷丙轉氨酶恢復正常前轉陰,但也有谷丙轉氨酶恢復正常而HCV RNA持續陽性者。 急性丙型肝炎患者的谷丙轉氨酶和穀草轉氨酶水平一般較低,但也有較高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活動度和膽鹼酯酶活性降低較少。急性丙肝如果不及時治療,多半病人會轉化為慢性丙型肝炎。 (二)慢性丙型肝炎的診斷 1.診斷依據:丙型肝炎病毒感染超過6個月,或發病日期不明、無肝炎史,但肝臟組織病理學檢查符合慢性肝炎,或根據症狀、體征、實驗室及影像學檢查結果綜合分析,亦可診斷。 慢性丙型肝炎患者中,約30%谷丙轉氨酶水平正常,約40%谷丙轉氨酶水水平低於2倍正常值上限。雖然大多數此類患者只有輕度肝損傷,但有部分患者可發展為肝硬化。病程較長的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎時血清白蛋白、凝血酶原活動度和膽鹼酯酶活性可明顯降低,其降低程度與疾病的嚴重程度成正比。 抗-HCV檢測適用於高危人群篩查,也可用於丙型肝炎感染者的初篩,一般獻血者首先必須檢測抗-HCV,如果為陽性,這份血樣肯定不合格,絕對不能成為獻血者。如果抗-HCV陽性可以確診丙型肝炎感染,但是一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出現抗-HCV假陽性,因此,一旦發現抗-HCV陽性,需要立刻檢測HCV RNA,如果為陽性可以確診為丙型肝炎病人,此時也有傳染性,需要治療。