Ⅰ 乙型肝炎病毒核心抗体IgM诊断试剂盒 有哪些厂家
英科新创(厦门)科技有限公司;上海科华生物工程股份有限公司;中山生物工程有限公司;珠海丽珠试剂股份有限公司;上海江莱生物科技有限公司等。
Ⅱ 求达安基因丙型肝炎病毒RNA试剂盒的说明书的试验步骤
【检验方法】
1 实验前准备
1.1 每瓶蛋白酶K(干粉)中各加入1.375ml的洗脱液,充分混匀,溶解。-20℃保存。
1.2 每管Carrier RNA(干粉)中各加入110µl的HCV内标溶液,充分混匀,溶解。-20℃保存(Carrier RNA为白色或半透明物质,请仔细检查,确保其完全
溶解)。
1.3抑制物去除液(浓缩液)中加入10ml的无水乙醇,并在瓶盖及瓶身上打勾。室温保存。
1.4每瓶去离子液(浓缩液)中各加入44ml的无水乙醇,并在瓶盖及瓶身上打勾。室温保存。
1.5 进行实验前须将病毒裂解液与Carrier RNA进行混合(现配现用),配置成裂解工作液。其比例见下表:
1人份 24人份 48人份
病毒裂解液 200µl 4.8ml 9.6ml
Carrier RNA 4µl 96µl 192µl
注:如将病毒裂解液、抑制物去除液不恰当地放置在低温时,可能会出现结晶沉淀。37℃温育至其消失即可;
各试剂使用完后,请旋紧瓶盖。
2 核酸提取(样本制备区)
将待测样本与阴性质控品、HCV 强阳性质控品、HCV 临界阳性质控品进行同步处理。
2.1 在1.5ml的无菌离心管内加入50µl的蛋白酶K;
2.2 取样本200µl加入离心管中;
2.3 再加入200µl的裂解工作液(即已含Carrier RNA的病毒裂解液),盖紧管盖,漩涡振荡15秒以充分混匀,高速离心10秒(防止温育时产生气泡),72℃
10分钟。同时可将洗脱液置于72℃预热;
2.4 再加入250µl 无水乙醇,盖紧管盖,振荡15秒;
2.5 将混合液全部吸至离心柱,室温下12,000rpm离心1分钟,将离心柱装至新的收集管;
2.6 将500µl的抑制物去除液加入离心柱,室温下12,000rpm离心1分钟,将离心柱装至新的收集管;
2.7 将500µl的去离子液加入离心柱,室温下12,000rpm离心1分钟,将离心柱装至新的收集管;
2.8 再次将500µl的去离子液加入离心柱,室温下12,000rpm离心1分钟,将离心柱装至新的收集管;
2.9 将离心柱-收集管于室温下14,000rpm离心3分钟以除去残余的乙醇;
2.10 将离心柱取出,放置于新的1.5ml离心管。打开离心柱盖子,72℃放置2分钟(使用干式恒温器,不能使用水浴锅);
2.11 在离心柱的膜的正上方小心加入72℃预热的洗脱液35µl,盖紧离心柱管盖,室温静置1分钟后,14,000rpm离心1分钟。离心管内即为病毒核酸溶液,建
议立即使用,如需保存,置于-20℃。
3 PCR试剂准备(试剂准备区)
大包装规格试剂适用:
从试剂盒中取出HCV 反应液A、HCV 反应液B、HCV 反应液C,室温融化后振荡混匀,8,000rpm离心数秒后使用。
取N个(N=待测样本个数+阴性质控品+HCV强阳性质控品+HCV临界阳性质控品+4管HCV 阳性定量参考品)PCR反应管,
HCV单人份扩增体系配制如下表:
组分 HCV 反应液A HCV 反应液B HCV 反应液C 总体积
用量 2µl 3µl 25µl 30µl
将各组分充分混合,混合好后进行短时离心将管壁上的液体全部离心至管底,之后将30µl扩增体系分装到PCR管中。
单管单人份规格试剂适用:
直接使用HCV-PCR反应管。
4 加样(样本制备区)
往上述HCV反应管中用带滤芯吸嘴分别加入提取后的待测样本核酸、HCV阴性质控品、HCV强阳性质控品、HCV临界阳性质控品和直接加入HCV 阳性定量参
考品20µl。盖紧管盖,8,000rpm离心数秒后转移至扩增检测区。
Ⅲ 酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用
酶联免疫诊断试剂盒(上海科华的试剂盒)的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色。 另外,常用的底物还有:1)AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀 什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,
且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。
TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。
由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。
TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试
剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等
优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈
黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。
ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用。
Ⅳ 谁有上海之江的丙型肝炎病毒(HCV)核酸定量测定试剂盒(荧光PCR法)说明书国械注准20153400264
网络文库里有,你可以点击这个链接去查看。
https://wk..com/view/a4a094d0d15abe23482f4d2d?ivk_sa=1023194j
Ⅳ 献血时丙型肝炎病毒抗体单种试剂检测不合格,请问是
如果是检测出有丙型肝炎抗体的话,建议去医院检查一下丙肝的rna复制和肝功能。然后再做定论,丙肝现在是一种可以治愈的疾病,早发现,早治疗。
Ⅵ 懂医学的朋友,麻烦帮我看一下我的“丙肝抗体检测报告单”,谢谢。
纯手打,解释给你听吧
Ig是免疫球蛋白的简写,是机体针对性地抵御微生物(细菌,病毒)产生的,一共有5种:其中IgG是感染性疾病慢性期的标志,IgM是近期感染时会升高。
做这个检查是看你以前感染过丙肝病毒没,结果是阴性的,说明你以前没感染过。
至于S/CO是做这个检查的试剂盒的一个参数,比值越大说明你血里的这种免疫球蛋白含量越高(其他蛋白会非特异地造成误差,就像你看空气是透明的一样,其实不是的,里面的飞尘、雾也能够吸收/反射光线),你只有0.437,恭喜你!(这么解释,你如果还不懂,不放心,那我这个医生就很失败了)。
Ⅶ 丙肝核心抗原检测试剂盒的介绍
丙肝核心抗原检测试剂由基因重组表达的丙型肝炎病毒核心区抗原(HCV-cAg)免疫制备的抗丙型肝炎病毒核心单克隆抗体包被微孔板、辣根过氧化物酶标记抗体及阳性、阴性对照等组成,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测人血清或血浆样 品中丙型肝炎病毒核心抗原。
Ⅷ 检测丙型肝炎病毒抗体结果提示是灰区,这是什么意思
如果抗-HCV阳性的话应该就感染了 丙型肝炎分为急性丙型肝炎和慢性丙型肝炎两种: (一)急性丙型肝炎的诊断标准 1.流行病学史:有输血史、应用血液制品史或明确的丙型肝炎暴露史。输血后或使用血液制品后,急性丙型肝炎的潜伏期为2~16周(平均7周)。 2.临床表现:全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛等,少数伴低热,轻度肝肿大,部分患者可出现脾肿大,少数患者可出现黄疽。部分患者无明显症状,表现为隐匿性感染。 3.实验室检查:谷丙转氨酶多呈轻度和中度升高,抗-HCV(丙型肝炎病毒抗体)和HCV RNA(丙型肝炎病毒核糖核酸阳性)。HCV RNA常在谷丙转氨酶恢复正常前转阴,但也有谷丙转氨酶恢复正常而HCV RNA持续阳性者。 急性丙型肝炎患者的谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平一般较低,但也有较高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活动度和胆碱酯酶活性降低较少。急性丙肝如果不及时治疗,多半病人会转化为慢性丙型肝炎。 (二)慢性丙型肝炎的诊断 1.诊断依据:丙型肝炎病毒感染超过6个月,或发病日期不明、无肝炎史,但肝脏组织病理学检查符合慢性肝炎,或根据症状、体征、实验室及影像学检查结果综合分析,亦可诊断。 慢性丙型肝炎患者中,约30%谷丙转氨酶水平正常,约40%谷丙转氨酶水水平低于2倍正常值上限。虽然大多数此类患者只有轻度肝损伤,但有部分患者可发展为肝硬化。病程较长的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎时血清白蛋白、凝血酶原活动度和胆碱酯酶活性可明显降低,其降低程度与疾病的严重程度成正比。 抗-HCV检测适用于高危人群筛查,也可用于丙型肝炎感染者的初筛,一般献血者首先必须检测抗-HCV,如果为阳性,这份血样肯定不合格,绝对不能成为献血者。如果抗-HCV阳性可以确诊丙型肝炎感染,但是一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出现抗-HCV假阳性,因此,一旦发现抗-HCV阳性,需要立刻检测HCV RNA,如果为阳性可以确诊为丙型肝炎病人,此时也有传染性,需要治疗。